Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the enumeration of presumptive Bacillus cereus - Colony-count technique at 30 degrees C (ISO 7932:2004 + Amd 1:2020, Corrected version 2020-08); German version EN ISO 7932:2004 + A1:2020
German title
Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln - Horizontales Verfahren zur Zählung von präsumtivem Bacillus cereus - Koloniezählverfahren bei 30 °C (ISO 7932:2004 + Amd 1:2020, korrigierte Fassung 2020-08); Deutsche Fassung EN ISO 7932:2004 + A1:2020
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Content
Content (de)
Nationales Vorwort
Änderungen
Frühere Ausgaben
Europäisches Vorwort
Anerkennungsnotiz
Anerkennungsnotiz
Vorwort der Änderung
Einleitung
Anwendungsbereich
Normative Verweisungen
Begriffe
präsumtiver Bacillus cereus (präsumtiver B. cereus)
Kurzbeschreibung
Verdünnungsflüssigkeit, Nährmedien und Reagenzien
Verdünnungsflüssigkeit
Nährboden (siehe [1])
Grundnährboden
Herstellung
Polymyxin-B-Lösung
Herstellung
Eigelb-Emulsion
Vollständiger Nährboden (MYP-Agar)
Herstellung
Herstellung der Agarplatten
Leistungsprüfung
Schafblutagar
Grundnährboden: Blutagar-Basis Nr. 2
Herstellung
Defibriniertes Schafblut
Vollständiger Nährboden
Herstellung
Geräte und Glasgeräte
Gerät für die Trockensterilisation (Wärmeschrank) oder Dampfsterilisation (Autoklav).
Probenahme
Probenvorbereitung
Durchführung
Einwaage, Erstverdünnung und Verdünnungen
Beimpfung und Bebrütung
Zählen der Kolonien
Bestätigung
Auswahl und Reinigung der Kolonien für die Bestätigung
Hämolyseprüfung auf Schafblutagar
Biochemische Beurteilung
Optionale Prüfungen
Allgemeines
Nachweis der cytK-1- oder cytK-2-Genvarianten des für Zytotoxin K codierenden Gens
Nachweis von Stämmen der Bacillus cereus-Gruppe, die Cereulid produzieren können
Beweglichkeitsprüfung für die Überprüfung auf B. anthracis
Mikroskopische Untersuchung des parasporalen Kristalls von B. thuringiensis
Angabe der Ergebnisse
Zählen der präsumtiven B. cereus-Kolonien
Keine Kolonien
Präzision
Ringversuch
Wiederholgrenze
Vergleichgrenze
Untersuchungsbericht
Vertrauensgrenzen bei der Schätzung geringer Koloniezahlen (normativ)
Ergebnisse von Ringversuchen (informativ)
Polymerase-Kettenreaktion zum Nachweis der Varianten cytK-1 bzw. cytK-2 des Zytotoxin K codierenden Gens in isolierten Stämmen der Bacillus cereus-Gruppe und zur Identifizierung von Bacillus cytotoxicus (informativ)
Allgemeines
Kurzbeschreibung
Allgemeines
Nukleinsäure-Extraktion
Amplifikation des Zielgens und Auswertung
Reagenzien
Allgemeines
Nukleinsäure-Extraktion
Reagenzien für die PCR
Primer
Ausstattung und Verbrauchsmaterialien
Allgemeines
Ausstattung für die Nukleinsäure-Extraktion
Mischer.
Ausstattung für die PCR
PCR-Gerät (en: PCR thermal cycler).
Ausstattung für den Nachweis der PCR-Produkte
Durchführung
Allgemeines
Nukleinsäure-Extraktion
PCR-Amplifikation
Allgemeines
PCR-Kontrollen
Temperatur-Zeit-Programm
Nachweis der PCR-Produkte
Auswertung des PCR-Ergebnisses
Bestätigung des PCR-Produkts
Leistungsmerkmale des Verfahrens
Allgemeines
Selektivität
Allgemeines
Inklusivität
Exklusivität
Sensitivität
Einschränkungen des PCR-Testverfahrens
Polymerase-Kettenreaktion zum Nachweis des ces-Gens, das für die Cereulid-Peptid-Synthetase in Stämmen der Bacillus cereus-Gruppe codiert (informativ)
Gelbasiertes PCR-Testverfahren für den Nachweis des ces-Gens, das für die Cereulid-Peptid-Synthetase in Stämmen der Bacillus cereus-Gruppe codiert
Allgemeines
Kurzbeschreibung
Reagenzien
Allgemeines
Reagenzien für die Nukleinsäure-Extraktion
Reagenzien für die PCR
PCR-Pufferlösung.
Oligonukleotide.
Reagenzien für die Gelelektrophorese
Ausstattung und Verbrauchsmaterialien
Allgemeines
Ausstattung für die Nukleinsäure-Extraktion
Mischer.
Ausstattung für die PCR
PCR-Gerät.
Ausstattung für den Nachweis des PCR-Produkts
Durchführung
Nukleinsäure-Extraktion
PCR-Ansatz
PCR-Kontrollen
Temperatur-Zeit-Programm
Nachweis der PCR-Produkte
Bestätigung eines positiven PCR-Ergebnisses
Leistungsmerkmale des Verfahrens
Allgemeines
Theoretische Bewertung des Verfahrens
Selektivität
Inklusivität
Exklusivität
Sensitivität
PCR-Testverfahren für den Nachweis des ces-Gens, das für die Cereulid-Peptid-Synthetase in Stämmen der Bacillus cereus-Gruppe codiert
Allgemeines
Kurzbeschreibung
Reagenzien
Allgemeines
Reagenzien für die Nukleinsäure-Extraktion
Gebrauchsfertiger Master Mix für die Real-time-PCR
Plasmid pUC19
Oligonukleotide
Ausstattung und Verbrauchsmaterialien
Allgemeines
Ausstattung für die Nukleinsäure-Extraktion
Mischer.
Ausstattung für die PCR
PCR-Gerät.
Ausstattung für den Nachweis der PCR-Produkte
Durchführung
Nukleinsäure-Extraktion
PCR-Amplifikation
PCR-Kontrollen
Temperatur-Zeit-Programm
Auswertung der Ergebnisse
Leistungsmerkmale des Verfahrens
Allgemeines
Theoretische Bewertung des Verfahrens
Selektivität
Inklusivität
Exklusivität
Sensitivität
Beweglichkeitsprüfung als ein Screeningverfahren (informativ)
Allgemeines
Kulturmedium
Zusammensetzung des BC-Beweglichkeitsmediums (en: BC motility medium)
Herstellung des BC-Beweglichkeitsmediums
Durchführung
Parasporaler Kristall von Bacillus thuringiensis — Protokoll für die mikroskopische Untersuchung von Nasspräparaten (informativ)
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