DIN EN 14164:2014-08

Diese Europäische Norm legt ein Verfahren zur Bestimmung von Vitamin B6 in Lebensmitteln mit Hochleistungs-Flüssigchromatographie (HPLC) fest. Vitamin B6 ist der Massenanteil der Gesamtmenge an Pyridoxin (PN), Pyridoxal (PL) und Pyridoxamin (PM), einschließlich ihrer phosphorylierten Derivate, die als Pyridoxin bestimmt werden. Die beta-glycosylierten Formen werden nicht berücksichtigt. Diese können mit dem in EN 14663 festgelegten Verfahren bestimmt werden, bei dem die verschiedenen Vitamere von Vitamin B6 (Pyridoxin, Pyridoxal und Pyridoxamin) getrennt und individuell bestimmt werden. Eine dritte Europäische Norm (EN 14166) bestimmt den Gesamtgehalt an Vitamin B6 mikrobiologisch. In dieser Norm werden Pyridoxal, Pyridoxamin und Pyridoxin durch saure Hydrolyse aus Lebensmitteln extrahiert und anschließend enzymatisch mit saurer Phosphatase dephosphoryliert. Bei der Reaktion mit Glyoxylsäure in Gegenwart von Fe₂+ als Katalysator wird Pyridoxamin zu Pyridoxal umgewandelt, das dann unter Einwirkung von Natriumborhydrid im basischen Medium zu Pyridoxin reduziert wird. Pyridoxin wird dann quantitativ in der Probenlösung durch HPLC mit Fluoreszenzdetektion bestimmt. Dieses Dokument wurde vom Technischen Komitee CEN/TC 275 "Lebensmittelanalytik - Horizontale Verfahren" erarbeitet, dessen Sekretariat vom DIN (Deutschland) gehalten wird. Das zuständige deutsche Gremium ist der Arbeitsausschuss NA 057-01-13 AA "Vitamine und Carotinoide" im Normenausschuss Lebensmittel und landwirtschaftliche Produkte (NAL) im DIN.